浮游生物計數(shù)框/計數(shù)管是淡水及海洋浮游生物定量分析中重要的計數(shù)工具,廣泛應用于藻類、原生動物、輪蟲等微型水生生物的顯微鏡下定量計數(shù)工作。在湖泊富營養(yǎng)化評價、水華預警監(jiān)測以及水產養(yǎng)殖餌料生物調查等領域,這些計數(shù)器具直接關系到數(shù)據(jù)統(tǒng)計的準確性和可比性。深入理解其結構設計特點并掌握規(guī)范的操作使用技術,對于保障浮游生物定量研究的可靠性具有重要意義。
從結構設計來看,浮游生物計數(shù)框通常采用有機玻璃或不銹鋼材質制造,外形為長方形平板狀,標準尺寸為長五十毫米、寬二十毫米,中間開有一個精確的矩形計數(shù)區(qū),常見規(guī)格有兩種。第一種是二十毫米乘二十毫米的正方形計數(shù)區(qū),面積為四百平方毫米,容積為零點一毫升,框體深度為零點二五毫米,這種規(guī)格適用于沉淀法濃縮后的樣品計數(shù)。第二種是五十毫米乘二十毫米的長方形計數(shù)區(qū),面積為一千平方毫米,容積為一毫升,深度為一毫米,這種規(guī)格適用于大型浮游動物或直接取樣的樣品計數(shù)。計數(shù)框的底面刻有精細的方格網(wǎng)線,將整個計數(shù)區(qū)劃分為若干個等面積的小方格,例如將二十毫米乘二十毫米區(qū)域劃分為五乘五共二十五個大方格,每個大方格再細分為若干小方格。這些方格網(wǎng)線為顯微鏡視野下的定位和計數(shù)提供了明確的坐標參考。浮游生物計數(shù)管則是一種圓柱形玻璃或透明塑料管,通常與計數(shù)框配合使用。計數(shù)管長度一般為十至二十厘米,內徑均勻,管身帶有刻度標記,較小刻度為毫升。管的一端為錐形收縮出口,可安裝滴管尖嘴或開關閥門,另一端為加樣口。計數(shù)管的主要功能是將濃縮后的樣品進行精確分樣和定量吸取,然后均勻注入計數(shù)框中進行顯微鏡觀察。
在操作使用技術方面,浮游生物計數(shù)框的使用應遵循樣品混勻、加樣靜置、視野計數(shù)和數(shù)據(jù)換算四個核心步驟。首先將采集并固定好的浮游生物樣品經過沉淀濃縮或過濾濃縮后,收集至定量瓶中定容到已知體積,例如三十毫升或五十毫升。計數(shù)前用吸管反復吹打樣品瓶底部,使沉淀在瓶底的生物體重新懸浮均勻。用微量移液器或計數(shù)管準確吸取零點一毫升或一毫升樣品,從計數(shù)框邊緣的加樣口緩慢注入,注意避免產生氣泡。蓋上專用的蓋玻片后靜置五至十分鐘,使生物體自然沉降到計數(shù)框底部的方格面上。將計數(shù)框放置在光學顯微鏡的載物臺上,先用低倍鏡掃描整個計數(shù)區(qū),了解生物分布情況,再根據(jù)生物大小選擇合適倍率進行計數(shù)。計數(shù)的原則是對于大型藻類或浮游動物采用全片計數(shù)法,即對計數(shù)區(qū)內所有個體進行統(tǒng)計;對于小型藻類則采用視野計數(shù)法,隨機選取十至二十個視野,統(tǒng)計每個視野中目標生物的數(shù)量,然后按視野面積與計數(shù)區(qū)總面積的比例換算成全片數(shù)量。計數(shù)時應沿方格網(wǎng)線逐行進行,避免重復計數(shù)或遺漏。每個樣品至少計數(shù)兩片,取平均值作為該樣品的計數(shù)結果。較后根據(jù)計數(shù)值、計數(shù)框容積、樣品濃縮倍數(shù)以及原始水樣體積等參數(shù),換算出單位體積水樣中浮游生物的數(shù)量,通常以每升多少個表示。
在維護保養(yǎng)方面,使用后的計數(shù)框應立即用蒸餾水沖洗,然后用軟布輕輕擦干,切忌使用硬物刮擦方格網(wǎng)線以免損傷刻度精度。計數(shù)管使用后需用蒸餾水反復抽洗,管壁不得殘留生物體碎片或固定液結晶。長期不用時應將計數(shù)框和計數(shù)管放入專用盒內保存,避免碰撞和劃傷。定期用顯微鏡檢查計數(shù)框方格網(wǎng)線的清晰度,如發(fā)現(xiàn)網(wǎng)線模糊或脫落應及時更換。通過規(guī)范的樣品處理、嚴謹?shù)挠嫈?shù)操作和科學的換算方法,浮游生物計數(shù)框和計數(shù)管能夠為水生生態(tài)學研究提供準確可靠的定量基礎數(shù)據(jù)。